鸡心包炎图

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TUhjnbcbe - 2021/2/19 1:11:00
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新城疫(ND)和鸡心包积液-肝炎综合征(HHS)是非常重要也是非常可怕的禽类疾病,严重威胁着全球的养禽业的发展。HHS是由4型禽腺病*(FAdV-4)强*引起的。如果鸡群共感染了新城疫病*(NDV)和4型腺病*(FAdV-4)会引起高度发病率和死亡率。传统的NDV和FAdV-4单价灭活疫苗必须单独进行免疫。如果要制备二价疫苗则需要分别培养NDV和FAdV-4。而在当前这种大规模的养殖现状下,不管是病*的培养还是疫苗的免疫都会随着养禽业的不断的扩大而变得更加耗时、费力且昂贵。因此研发能够同时防控ND和HHS的有效疫苗是非常有必要的。

在此项研究中,研究者通过在重组NDV上表达一株FAdV-4流行株的fiber-2基因,研发了一种NDV-FAdV-4候选疫苗,rLaSota-fiber-2(图1)。经RT-PCR和westernblotting验证fiber-2能够正常表达,并且rLasota-fiber2重组基因可以稳定表达和复制。此外还证明了rLasota-fiber2作为亲本*株在SPF鸡胚中能够高效复制,滴度达到了3X.5EID50/ul。

图1pNDFL-Fiber2cDNA结构示意图

用rLasota-fiber2活疫苗和灭活疫苗分别对鸡进行免疫,对各自产生的抗体水平进行检测。数据分析说明2周龄SPF鸡在免疫了单剂量的活疫苗和灭活疫苗后均产生了较强的针对NDV和FAdV-4的抗体反应。但是活疫苗能够更早的引起抗体反应并且抗体水平更高。免疫三周后,对一半的免疫组的鸡和对照组的鸡均通过肌肉注射攻*FAdV-4CH/HNJZ/株,攻*量为TCID50,另一半的免疫组的鸡和对照组的鸡肌肉注射攻*NDVF48E9株,攻*量为TCID50。图3和表1结果显示所有免疫组的鸡在注射了致死剂量的NDV后均受到了免疫保护(图3A)。相反,对照组鸡在NDV攻*两天后均出现了精神萎靡的现象,在攻*后第4天%死亡。rLasota-fiber2活疫苗免疫组对FAdV-4起到了完全保护效果,而灭活疫苗组只有70%的免疫保护率(Fig.3B)。非免疫组鸡在FAdV-4攻*2天后变得精神颓废、萎靡,并出现聚堆,羽毛竖立的现象。在攻*第3天开始出现死亡,第6天全部死亡。rLasota-fiber2活疫苗和灭活免疫组的鸡未出现明显临床症状。

图2rLasota-fiber2免疫后鸡产生的针对NDV和FAdV-4的抗体水平

图3鸡在FAdV-4和NDV攻*后的存活率

表1泄殖腔拭子中NDV和FAdV-4的检测

NA:因鸡死亡无法检测

a:存活鸡的数量/鸡的总量

b:排*鸡的数量/鸡的总量

未免疫组的鸡在FAdV-4攻*后引起了多种可眼观的HHS病变现象,包括心包积液,肝脏变色肿胀,肾脏有炎症(Fig4A&4D)。活疫苗组和存活的未免疫组的鸡没有表现任何HHS现象(Fig4B&4E,4C&4F)。经组织学观察HHS的症状表现为心肌破碎,与心肌炎相关的淋巴液浸润;肝细胞变性、坏死,间质性肺水肿和肺部淋巴细胞浸润;肾小管上皮细胞变性和空泡性坏死;脾脏淋巴细胞的减少和坏死;法氏囊的淋巴细胞解体;腺胃上皮细胞水肿、坏死。然而活疫苗免疫组和灭活疫苗存活鸡均未有HHS症状表现(Fig.6)。

图4FAdV-4攻*后解剖学观察

图5FAdV-4攻*后鸡不同组织的组织学观察

因为fiber-2与目前中国高发和高致病性的FAdV-4*株的*力有关,在加上此项研究中证明的单剂量肌肉注射rLasota-fiber2疫苗在感染同源FAdV-4后能够起到完全的保护作用,这都说明了fiber-2在感染过程中有着关键作用。

通过饮水免疫、喷洒或者喷雾免疫新城疫活疫苗都是相比肌肉注射更加省钱和省力的方式。由此在此项试验中也测试了通过饮水或者滴鼻点眼的方式免疫rLasota-fiber2。但不幸的是这种方式虽然能完全保护不受NDV的感染,但在FAdV-4感染后却不能起到保护作用。

总体来说该重组疫苗能够稳定表达fiber-2基因,并且能够对同源NDV和同源FAdV-4也能够起到一定的免疫作用。这也说明了rLasota-fiber2疫苗对控制HHS和ND来说是一种非常有前景的疫苗。

(文章转自“Protectionofchickensagainsthepatitis-hydropericardiumsyndromeandNewcastlediseasewithare

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